گېموگلوبىن ئېلېكتروفورېس تەجرىبىسى

تەجرىبە پرىنسىپى

گېموگلوبىن ئېلېكتىرو فورمىسى ھەر خىل نورمال ۋە بىنورمال گېموگلوبىنلارنى بايقاش ۋە دەلىللەشنى مەقسەت قىلىدۇ.

ئوخشىمىغان گېموگلوبىن تۈرىدىكى توكنىڭ ئوخشىمىغان توك ۋە ئېلېكتر نوقتىسى سەۋەبىدىن ، مەلۇم pH بۇففېر ئېرىتمىسىدە ، گېموگلوبىننىڭ ئىزوئېلېكترىك نۇقتىسى بۇففېر ئېرىتمىسىنىڭ pH دىن تۆۋەن بولغاندا ، گېموگلوبىن مەنپىي زەرەتنى ئېلىپ ، ئېلېكتروفورېز جەريانىدا ئانودقا يۆتكىلىدۇ. ئەكسىچە ، مۇسبەت زەرەتلەنگەن گېموگلوبىن كاتود تەرەپكە قاراپ ھەرىكەت قىلىدۇ.

مەلۇم توك بېسىمى ئاستىدا ۋە مەلۇم ئېلېكتروفورېز ۋاقتىدىن كېيىن ، ئوخشىمىغان توك ۋە مولېكۇلا ئېغىرلىقىدىكى گېموگلوبىن ئوخشىمىغان كۆچۈش يۆنىلىشى ۋە سۈرئىتىنى نامايان قىلىدۇ. بۇ پەرقلىق رايونلارنى ئايرىيالايدۇ ، كېيىنكى رايونلاردا رەڭلىك ياكى ئېلېكتروفورنىكىلىق سىكانىرلاش ئانالىزى ئېلىپ بېرىلىپ ، ھەر خىل گېموگلوبىنلارنى مىقدارلاشتۇرغىلى بولىدۇ. ئەڭ كۆپ قوللىنىلىدىغان ئۇسۇل pH 8.6 سېللۇلوزا ئاتسېتات پەردىسى ئېلېكتروفورېزى.

سىپوپلازما ئىچىدە ، گلىكوگېن ياكى پولىساخارىد ماددىلىرىدا بار بولغان ئېتىلېن گلىكول گۇرۇپپىسى (CHOP-CHOH) قەرەللىك كىسلاتا ئارقىلىق ئوكسىدلىنىپ ، ئالدېگىد گۇرۇپپىسىغا ئايلىنىدۇ (CHO-CHO). بۇ ئالدېگىد گۇرۇپپىلىرى رەڭسىز بىنەپشە-قىزىل شىف رېئاكتېنتى بىلەن بىرلىشىپ ، بىنەپشە رەڭلىك قىزىل بوياق ھاسىل قىلىپ ، ھۈجەيرىدە پولىساخارىد بار. بۇ خىل ئىنكاس دەۋرىيلىك كىسلاتا-شىف (PAS) داغ دەپ ئاتىلىدۇ ، ئىلگىرى گلىكوگېن داغ دەپ ئاتىلىدۇ.

تەجرىبە ئۇسۇلى

ماتېرىياللار:سېللۇلوزا ئاتسېتاتmemتورمۇز ، ئېلېكتروفورېز ئۈسكۈنىسى(DYCP-38C ۋە توك بىلەن تەمىنلەش DYY-6C), دەرىجىدىن تاشقىرى ئەۋرىشكە يۈكلەش قورالى (تۇرۇبا)، سپېكترو فوتومېتىر ، رەڭدار كۇۋەيت, buffers.

Buffer:

.

.

تەرتىپ:

PHemoglobin Solution نىڭ تۆلەم پۇلى

تەركىبىدە 3 مىللىلېتىر قان تەركىبىدە خېپارىن ياكى ناترىي سىترات بار بولۇپ ، ئوكسىدلىنىشقا قارشى تۇرغۇچى. 2000 rpm دە Centrifuge 10 مىنۇت تۇرغۇزۇپ ، پلازمىنى تاشلىۋېتىڭ. قىزىل قان ھۈجەيرىسىنى فىزىئولوگىيىلىك تۇز بىلەن ئۈچ قېتىم يۇيۇڭ (ھەر قېتىمدا 750 مىنۇت ، ھەر قېتىمدا 5 مىنۇت مەركەزدىن قاچۇرۇش). Centrifuge كەچ سائەت 2200 دە 10 مىنۇت تۇرغۇزۇپ ، خاسىيەتلىك ئادەمنى تاشلىۋېتىڭ. ئوخشاش مىقداردىكى دىرىللانغان سۇنى قوشۇڭ ، ئاندىن كاربون تېتراخلورىدنىڭ مىقدارىنىڭ 0.5 ھەسسىسىنى قوشۇڭ. 5 مىنۇت كۈچەپ سىلكىڭ ، ئاندىن كەچ سائەت 2200 دە مەركەزدىن قاچۇرۇپ 10 مىنۇت تۇرغۇزۇپ ، يۇقىرىدىكى Hb ئېرىتمىسىنى كېيىن ئىشلىتىڭ.

Membrane نى چىلاش

سېللۇلوزا ئاتسېتات پەردىسىنى 3 سانتىمېتىر × 8 سانتىمېتىر كېلىدىغان بەلۋاغقا كېسىڭ. ئۇلارنى pH 8.6 TEB بۇففېرغا چىلاپ تولۇق تويۇنغانغا چىلاپ ، ئاندىن سۈزگۈچ قەغەز بىلەن قۇرۇتۇڭ.

داغ

تۇرۇبا ئارقىلىق گېموگلوبىن ئېرىتمىسىنىڭ 10 مىللىمېتىرنى سېللۇلوزا ئاتسېتات پەردىسىگە (قوپال تەرىپى) تىك تىكلەپ ، قىردىن 1.5 سانتىمېتىر ئەتراپىدا ئېنىقلاڭ.

Electrophoresis

بورففېر ئېرىتمىسىنى ئېلېكتروفورېز ئۆيىگە تۆكۈڭ. سېللۇلوزا ئاتسېتات پەردىسىنى داغ بىلەن كامېرنىڭ كاتود ئۇچىغا قويۇڭ. 200 V دە 30 مىنۇت ئىجرا قىلىڭ.

Elution

HbA ۋە HbA2 رايونىنى كېسىپ ، ئايرىم سىناق نەيچىسىگە قويۇپ ، ئايرىم-ئايرىم ھالدا 15 مىللىلېتىر ۋە 3 مىللىلېتىر ئارىلاشتۇرۇلغان سۇ قوشۇڭ. ئاستا-ئاستا سىلكىپ ، گېموگلوبىننى تولۇق ئېلىۋېتىڭ ، ئاندىن ئارىلاشتۇرۇڭ.

Colorimetry

ئېرىتىلگەن ئېرىتمىسى ئۈچۈن ئېرىتىلگەن سۇدىن پايدىلىنىپ سۈمۈرۈلۈشنى نۆل قىلىپ ، سۈمۈرۈلۈش مىقدارىنى 415 nm.

ھېسابلاش

HbA2 (%) = HbA2 تۇرۇبىسىنىڭ سۈمۈرۈلۈشى / (HbA تۇرۇبىسىنىڭ سۈمۈرۈلۈشى × 5 + HbA2 تۇرۇبىسىنىڭ سۈمۈرۈلۈشى) × 100%

تەجرىبە نەتىجىسىنى ھېسابلاش

PH 8.6 TEB بۇففېر سېللۇلوزا ئاتسېتات ئېلېكتروفورېزنىڭ پايدىلىنىش دائىرىسى: HbA> 95% ، HbA2 1% -3.1%

ئىزاھات

ئېلېكتروفورېز ۋاقتى بەك ئۇزۇن بولۇپ كەتمەسلىكى كېرەك. ئېلېكتروفورېز جەريانىدا سېللۇلوزا ئاتسېتات پەردىسى قۇرۇپ كەتمەسلىكى كېرەك. HbA بىلەن HbA2 ئېنىق ئايرىلغاندا ئېلېكتروفورېزنى توختىتىڭ. ئۇزۇنغا سوزۇلغان ئېلېكتروفورېز بەلۋاغنىڭ تارقىلىشىنى ۋە قالايمىقانلىشىشنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ.

بەك كۆپ ئەۋرىشكە ئىشلىتىشتىن ساقلىنىڭ. ھەددىدىن زىيادە گېموگلوبىن سۇيۇقلۇقى بەلۋاغنىڭ ئاجرىلىپ چىقىشىنى ياكى داغنىڭ يېتەرلىك بولماسلىقىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ ، نەتىجىدە HbA سەۋىيىسى يالغان ئۆرلەيدۇ.

سېللۇلوزا ئاتسېتات پەردىسىنىڭ ئاقسىل بىلەن بۇلغىنىشىنىڭ ئالدىنى ئالىدۇ.

توك بەك يۇقىرى بولۇپ كەتمەسلىكى كېرەك. بولمىسا ، گېموگلوبىن بەلۋاغلىرى ئايرىلماسلىقى مۇمكىن.

ھەمىشە نورمال شەخسلەرنىڭ ئەۋرىشكىسى ۋە زۆرۈر بولغان بىنورمال گېموگلوبىننى كونترول سۈپىتىدە ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ.

بېيجىڭ ليۇيى بىئوتېخنىكا مودېل بولغان گېموگلوبىن ئېلېكتىرو فورمىسى ئۈچۈن كەسپىي ئېلېكترو فورېس باكىنى ئىشلەپچىقىرىدۇDYCP-38Cسېللۇلوزا ئاتسېتات پەردىسى ئېلېكتروفورېز باكى ، سېللۇلوزا ئاتسېتات پەردىسى ئېلېكتروفورېز باكى ئۈچۈن ئىككى خىل ئېلېكترو فورېز توك بىلەن تەمىنلەيدۇ.DYY-2CۋەDYY-6Cتوك بىلەن تەمىنلەش.

شۇنىڭ بىلەن بىر ۋاقىتتا ، بېيجىڭ ليۇيى بىئوتېخنىكا خېرىدارلارنى سېللۇلوزا ئاتسېتات پەردىسى بىلەن تەمىنلەيدۇ ، سېللۇلوزا ئاتسېتات پەردىسىنىڭ چوڭ-كىچىكلىكىنى خاسلاشتۇرغىلى بولىدۇ. بىزدىن ئەۋرىشكە ۋە تېخىمۇ كۆپ ئۇچۇرلارنى سورىشىڭىزنى قارشى ئالىمىز.

بېيجىڭ ليۇيى ماركىسىنىڭ جۇڭگودا 50 نەچچە يىللىق تارىخى بار ، بۇ شىركەت دۇنيانىڭ ھەرقايسى جايلىرىدا مۇقىم ۋە سۈپەتلىك مەھسۇلاتلار بىلەن تەمىنلەيدۇ. كۆپ يىللىق تەرەققىيات ئارقىلىق ، ئۇ سىزنىڭ تاللىشىڭىزغا ئەرزىيدۇ!

بىز ھازىر شېرىك ئىزدەۋاتىمىز ، OEM ئېلېكتروفورېس باكى ۋە تارقاتقۇچىلار قارشى ئېلىنىدۇ.

ئەگەر مەھسۇلاتلىرىمىزنى سېتىۋېلىش پىلانىڭىز بولسا ، ئىككىلەنمەي بىز بىلەن ئالاقىلىشىڭ. بىزگە ئېلېكترونلۇق خەت ئارقىلىق ئۇچۇر ئەۋەتسىڭىز بولىدۇ[ئېلېكترونلۇق خەت قوغدالدى]ياكى[ئېلېكترونلۇق خەت قوغدالدى]، ياكى +86 15810650221 غا تېلېفون قىلىڭ ياكى Whatsapp +86 15810650221 ياكى Wechat نى قوشۇڭ: 15810650221