پولىئاكرىلامىد گېلى ئېلېكتروفورىسى دېگەن نېمە؟

پولىئاكرىلامىد گېلى ئېلېكتروفورىسى

گېلى ئېلېكتروفورسىيىسى تەجرىبىخانىلاردىكى بىئولوگىيىلىك پەنلەرنىڭ ئاساسى تېخنىكىسى بولۇپ ، DNA ، RNA ۋە ئاقسىل قاتارلىق ماكرو مولېكۇلالارنىڭ ئايرىلىشىغا يول قويىدۇ. ئوخشىمىغان ئايرىش مېدىيالىرى ۋە مېخانىزملىرى بۇ مولېكۇلالارنىڭ بۆلەكلىرىنى ئۇلارنىڭ فىزىكىلىق ئالاھىدىلىكىدىن پايدىلىنىپ تېخىمۇ ئۈنۈملۈك ئايرىيالايدۇ. بولۇپمۇ ئاقسىلغا نىسبەتەن ، پولىئاكرىلامىد گېلى ئېلېكتروفورىسى (PAGE) ھەمىشە تاللاش تېخنىكىسى.

1

PAGE بولسا ئاقسىل قاتارلىق ماكرو مولېكۇلانى ئېلېكتروفورېتىك ھەرىكەتچانلىقىغا ئاساسەن ئايرىيدىغان تېخنىكا ، يەنى ئانالىزچىلارنىڭ قارشى توكنىڭ ئېلېكترودقا قاراپ ھەرىكەت قىلىش ئىقتىدارى. PAGE دا ، بۇ مولېكۇلانىڭ زەرەتلىنىشى ، چوڭ-كىچىكلىكى (مولېكۇلا ئېغىرلىقى) ۋە شەكلى تەرىپىدىن بەلگىلىنىدۇ. ئانالىز پولىئاكرىلامىد گېلىدا ھاسىل بولغان تەر تۆشۈكچىلىرىدىن ئۆتىدۇ. DNA ۋە RNA غا ئوخشىمايدىغىنى ، ئاقسىل بىرلەشتۈرۈلگەن ئامىنو كىسلاتاغا ئاساسەن ئوخشىمايدۇ ، بۇ ئۇلارنىڭ يۈرۈشۈشىگە تەسىر كۆرسىتىدۇ. ئامىنو كىسلاتاسى يەنە ئۇلارنىڭ چوڭ-كىچىكلىكىگە تەسىر قىلىدىغان ئىككىلەمچى قۇرۇلمىلارنى ھاسىل قىلىشى مۇمكىن ، نەتىجىدە ئۇلارنىڭ تەر تۆشۈكچىلىرىدىن قانداق ئۆتەلەيدىغانلىقىغا تەسىر كۆرسىتىدۇ. شۇڭلاشقا بەزىدە چوڭ-كىچىكلىكىنى تېخىمۇ توغرا مۆلچەرلەشكە توغرا كەلسە ، ئېلېكتروفورېزدىن ئىلگىرى ئاقسىلنى رەتكە تۇرغۇزۇشنى ئارزۇ قىلىش مۇمكىن.

SDS PAGE

ناترىي-دودسىل سۇلفات پولىئاكرىلامىد گېلى ئېلېكتروفورىسى 5 دىن 250 كىلوگرامغىچە بولغان ئاقسىل مولېكۇلاسىنى ئايرىشتا قوللىنىلىدىغان تېخنىكا. ئاقسىل پەقەت مولېكۇلا ئېغىرلىقىغا ئاساسەن ئايرىلىدۇ. ناترىي دودسىل سۇلفات ، ئانئونىك ئوكسىدلىنىشقا قارشى تۇرغۇچى ماددا بولۇپ ، گېلى تەييارلاشتا ئاقسىل ئەۋرىشكىسىنىڭ ئىچكى زەربىسىنى نىقابلاپ ، ئۇلارغا ماس نىسبەتتە توك بېرىدۇ. ئاددىي قىلىپ ئېيتقاندا ، ئۇ ئاقسىلنى رەتلەپ ، ئۇلارغا پاسسىپ زەرەت بېرىدۇ.

2

يەرلىك بەت

يەرلىك PAGE ئاقسىلنى ئايرىش ئۈچۈن ئايرىلمىغان گېلىنى ئىشلىتىدىغان تېخنىكا. SDS PAGE غا ئوخشىمايدىغىنى ، گېلى تەييارلاشتا ھېچقانداق ئايرىش دورىسى قوشۇلمايدۇ. نەتىجىدە ئاقسىلنىڭ ئايرىلىشى ئاقسىلنىڭ زەرەتلىنىشى ۋە چوڭ-كىچىكلىكىگە ئاساسەن ئېلىپ بېرىلىدۇ. بۇ تېخنىكىدا ئاقسىلنىڭ ئۆزگىرىشى ، قاتلىنىشى ۋە ئامىنو كىسلاتا زەنجىرى ئايرىلىشقا باغلىق ئامىللاردۇر. بۇ جەرياندا ئاقسىل بۇزۇلمايدۇ ، ئايرىش تاماملانغاندىن كېيىن ئەسلىگە كەلتۈرگىلى بولىدۇ.

3

پولىئاكرىلامىد گېلى ئېلېكتروفورىسى (PAGE) قانداق ئىشلەيدۇ؟

PAGE نىڭ ئاساسلىق پرىنسىپى ئانالىزچىلارنى ئېلېكتر ئېقىمى ئارقىلىق پولىئاكرىلامىد گېلىنىڭ تۆشۈكچىلىرىدىن ئۆتكۈزۈش ئارقىلىق ئايرىش. بۇنى ئەمەلگە ئاشۇرۇش ئۈچۈن ئاكرىلامىد - بىساكرىلامىد ئارىلاشمىسى ئاممىياك سۇلفات (APS) نى قوشۇش ئارقىلىق پولىمېرلاشتۇرۇلغان (پولىئاكرىلامىد). Tetramethylethylenediamine (TEMED) تەرىپىدىن كاتالىزاتورلۇق قىلىنغان بۇ رېئاكسىيە ئانالىزچىلار يۆتكىيەلەيدىغان تۆشۈكچىلەرگە ئوخشاش قۇرۇلمىنى شەكىللەندۈرىدۇ (2-رەسىم). گېلىغا كىرگۈزۈلگەن ئومۇمىي ئاكرىلامىدنىڭ نىسبىتى قانچە يۇقىرى بولسا ، تەر تۆشۈكچىلىرى شۇنچە كىچىك بولىدۇ ، شۇڭا ئۆتەلەيدىغان ئاقسىل شۇنچە كىچىك بولىدۇ. ئاكرىلامىدنىڭ بىساكرىلامىد بىلەن بولغان نىسبىتىمۇ تۆشۈكچىلەرنىڭ چوڭ-كىچىكلىكىگە تەسىر كۆرسىتىدۇ ، ئەمما بۇ دائىم تۇراقلىق ھالەتتە ساقلىنىدۇ. كىچىك تەر تۆشۈكچىلىرىمۇ كىچىك ئاقسىللارنىڭ گېلى ئارقىلىق ھەرىكەتلىنىش سۈرئىتىنى تۆۋەنلىتىدۇ ، ئۇلارنىڭ ئېنىقلىق دەرىجىسىنى ئۆستۈرىدۇ ۋە توك ئىشلەتكەندە تېزلىكتە بۇففېرغا قېچىپ كېتىشنىڭ ئالدىنى ئالىدۇ.

3-1

پولىئاكرىلامىد گېلى ئېلېكتروفورېزىنىڭ ئۈسكۈنىلىرى

گېلى ئېلېكتروفورېز ھۈجەيرىسى (تانكا / پالاتا)
پولىئاكرىلامىد گېلى ئېلېكتروفورېزىنىڭ گېلى باكى ئاگاروزا گېلى باكىغا ئوخشىمايدۇ. ئاگاروزا گېلى گورىزونتال ، PAGE باكى بولسا تىك. ۋېرتىكال ئېلېكتروفورېز ھۈجەيرىسى (تانكا / كامېر) ئارقىلىق نېپىز گېلى (ئادەتتە 1.0 مىللىمېتىر ياكى 1.5 مىللىمېتىر) ئىككى ئەينەك تاختاينىڭ ئارىسىغا قۇيۇلۇپ ئورنىتىلىدۇ ، شۇنىڭ بىلەن گېلىنىڭ ئاستى بىر كامېردىكى بۇففېرغا ، ئۈستى بۇففېرغا چۆكۈپ كېتىدۇ. باشقا ئۆيدە. توك ئىشلىتىلگەندە ، ئاز مىقداردىكى بۇففېر گېلى ئارقىلىق ئۈستۈنكى كامېردىن تۆۋەنكى ئۆيگە يۆتكىلىدۇ. قۇراشتۇرۇشنىڭ تىك ھالەتتە تۇرۇشىغا كاپالەتلىك قىلىدىغان كۈچلۈك قىسقۇچلار بىلەن ، بۇ ئۈسكۈنىلەر ھەتتا سوۋۇتۇش ئارقىلىق تېز سۈرئەتلىك گېلىنىڭ يۈرۈشىنى ئاسانلاشتۇرىدۇ.

4

بېيجىڭ ليۇيى بىئوتېخنىكا چەكلىك شىركىتى (ليۇيى بىئوتېخنىكا) بىر قاتار چوڭلۇقتىكى پولىئاكرىلامىد گېلى ئېلېكترو فورېز ھۈجەيرىسى (تانكا / كامېر) ئىشلەپچىقىرىدۇ. DYCZ-20C ۋە DYCZ-20G تىپلىرى DNA رەت تەرتىپىنى ئانالىز قىلىش ئۈچۈن تىك ئېلېكتروفورېز ھۈجەيرىسى (تانكا / كامېر). بىر قىسىم ۋېرتىكال ئېلېكتروفورېز ھۈجەيرىسى (تانكا / كامېر) پارچىلاش سىستېمىسىغا ماس كېلىدۇ ، مەسىلەن DYCZ-24DN ، DYCZ-25D ۋە DYCZ-25E تىپى غەربنىڭ Blotting سىستېمىسى مودېلى DYCZ-40D ، DYCZ-40G ۋە DYCZ-40F ، بۇ ئاقسىل مولېكۇلاسىنى گېلىدىن پەردىگە يۆتكەشكە ئىشلىتىلىدۇ. SDS-PAGE ئېلېكترو فورمىسىدىن كېيىن ، Western Blotting ئاقسىل ئارىلاشمىسىدىكى مەلۇم ئاقسىلنى بايقاش تېخنىكىسى. تەجرىبە تەلىپىگە ئاساسەن بۇ پارچىلاش سىستېمىلىرىنى تاللىيالايسىز.

6

ئېلېكتروفورېس توك بىلەن تەمىنلەش
گېلىنى يۈرۈشتۈرۈش ئۈچۈن توك بىلەن تەمىنلەش ئۈچۈن ، ئېلېكتروفورېز توك بىلەن تەمىنلىشىڭىز كېرەك. ليۇيى بىئوتېخنىكىسىدا بىز بارلىق قوللىنىشچان پروگراممىلارنى بىر يۈرۈش ئېلېكترو فورېز بىلەن تەمىنلەيمىز. DYY-12 ۋە DYY-12C تىپلىق يۇقىرى تۇراقلىق بېسىم ۋە توك بېسىمى يۇقىرى بېسىملىق ئېلېكترفورېزنى قاندۇرالايدۇ. ئۇنىڭدا تۇرۇش ، ۋاقىت ، VH ۋە باسقۇچلۇق قوللىنىش ئىقتىدارى بار. ئۇلار IEF ۋە DNA تەرتىپلىك ئېلېكتروفورېز قوللىنىشقا ماس كېلىدۇ. ئادەتتىكى ئاقسىل ۋە DNA ئېلېكتروفورېز قوللىنىشتا ، بىزدە DYY-2C ، DYY-6C ، DYY-10 قاتارلىقلار بار ، بۇلار ئېلېكترفورېز ھۈجەيرىسى (تانكا / كامېر) بىلەن ئىسسىق سېتىش كۈچى بىلەن تەمىنلەيدۇ. بۇلارنى ئوتتۇرا ۋە تۆۋەن بېسىملىق ئېلېكتروفورېز قوللىنىشچان پروگراممىلىرىغا ئىشلىتىشكە بولىدۇ ، مەسىلەن مەكتەپ تەجرىبىخانىسى ئىشلىتىش ، دوختۇرخانا تەجرىبىخانىسى قاتارلىقلار. توك بىلەن تەمىنلەيدىغان تېخىمۇ كۆپ مودېللار تور بېكىتىمىزنى زىيارەت قىلىڭ.

7

ليۇيى ماركىسىنىڭ جۇڭگودا 50 نەچچە يىللىق تارىخى بار ، بۇ شىركەت دۇنيانىڭ ھەرقايسى جايلىرىدا مۇقىم ۋە سۈپەتلىك مەھسۇلاتلار بىلەن تەمىنلەيدۇ. كۆپ يىللىق تەرەققىيات ئارقىلىق ، ئۇ سىزنىڭ تاللىشىڭىزغا ئەرزىيدۇ!

بىز ھەققىدە تېخىمۇ كۆپ ئۇچۇرغا ئېرىشىش ئۈچۈن ئېلېكترونلۇق خەت ئارقىلىق بىز بىلەن ئالاقىلىشىڭ[ئېلېكترونلۇق خەت قوغدالدى] or [ئېلېكترونلۇق خەت قوغدالدى].

پولىئاكرىلامىد گېلى ئېلېكتروفورىسى دېگەن نېمە؟
1. كارېن ستېۋارد دوكتورلۇق ئۇنۋانىغا ئېرىشكەن پولىئاكرىلامىد گېلى ئېلېكتروفورىسى ، ئۇنىڭ قانداق ئىشلەيدىغانلىقى ، تېخنىكىلىق ۋارىيانتلىرى ۋە قوللىنىلىشى


يوللانغان ۋاقتى: 5-ئاينىڭ 23-كۈنىدىن 22-كۈنىگىچە